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污染  

2011-11-28 00:35:40|  分类: 科技民工 |  标签: |举报 |字号 订阅

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昨天处理细胞的时候,发现大面积细胞污染,几乎全部细胞都被波及,一大半已经没有保留价值,连扔13瓶细胞,实在是痛心之至。果然是常在河边走,哪能不湿鞋。传说中的细胞污染,终于也被我碰上了一次,场面极度惨烈。

周三处理细胞的时候,状态还好,且不记得有明显操作失误。想想如此大面积细胞污染,很可能是培养基或者PBS之类的污染造成;于是询问实验室其他养细胞的战友,均未发现明显细胞污染。心存疑惑地将培养基做了细菌培养,24小时未见明显微生物生长。

今天仔细分析了下细胞污染的状况,觉得并不像是一般的细菌或者真菌。毕竟培养基里加了双抗,只要不是明显的操作失误,不会造成严重污染。培养基也并不浑浊,没有见到菌落或菌丝生长;但细胞状态奇差,几乎全部呈现凋亡或死亡状态,400倍视野下可见细胞间存在明显黑色颗粒样物质,呈现类似布朗运动的振动,甚至在细胞内都能看到这种细沙样的黑色小点。找大师姐鉴定了下,觉得跟她之前从公司拿回来的几株细胞有相似的情况。上网一搜,居然是传说中极度恶劣的“黑胶虫”。今天再仔细把其他几个人的细胞都看了下,结果发现都多少有一些。只是尚未严重影响到细胞生长。估计我的细胞因为是原代培养的关系,超级易感。而且这东西随着细胞传代而传代,很可能早就有感染,只是没有发现罢了。

处理起来非常棘手,如果确定是黑胶虫的话。这东西既不能被抗生素杀灭,也不能被滤器去除,甚至有认为它干脆连生物都不是,就是一种血清被灭活之后的变性蛋白沉淀(说实话,我觉得这种描述很像是朊病毒之类的东东)。明天让实验室老师确认一下,如果真的是,恐怕细胞室就得大清理了。但今天很不幸的在丁香园上看到有人说这玩意连甲醛熏蒸都奈何不得。其实还是怀疑最新启用的血清有点问题,毕竟不是在老地方订的,而且记得某个人之前提醒过我PAA血清有假的。。。总之先停一阵细胞实验再说,如果确认是黑胶虫的话,清理下细胞间再换好一点的血清希望就能解决了吧。郁闷,虽说之前都有冻存细胞,但是原代细胞冻存后复苏率不太稳定,尤其是早期冻存的那些。

最后上一张图,今天又扔掉两瓶,扔之前拍照留了个念。

污染 - fantasypanda - 可爱的家

 倒置相差显微镜,400倍。细胞间可见明显黑色颗粒样物质聚集,反光比较强烈的圆形是已经死掉的细胞。

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